四、促进免疫细胞因子的产生

我们发现，灵芝多糖BN3A，BN3B和BN3C（0.05～1μg/ml）均可显著增加C57BL/6j小鼠脾细胞在ConA存在条件下的IL—2产生，并可部分地拮抗环孢霉素A和氢化可的松对小鼠脾细胞产生IL—2的抑制作用。与3月龄小鼠比较，19月龄小鼠脾细胞IL—2产生减少17.6%～20.3%，此三种多糖均可使之恢复至3月龄小鼠的正常水平。

在混合淋巴细胞培养中，T辅助细胞（Th）受到同种异型抗原刺激后，在巨噬细胞分泌的IL—1协同下，发生增殖反应并合成分泌IL—2。在反应体系中加入终浓度为200μg/ml的GL—B，其作用呈双向反应。即在培养的前24h，GL—B可促进脾细胞合成分泌IL—2，24h以后则逐渐减少合成分泌IL—2。当固定培养时间为12h，改变GL—B的浓度，则可见GL—B呈浓度依赖性地促进脾细胞合成分泌IL—2（表7-5）。由于GL—B对IL—2依赖株HT2细胞以及同种异型抗原或ConA活化的脾细胞均无促增殖作用，故我们认为GL—B不能促进活化细胞的IL—2受体表达。

表7-5  灵芝多糖GL—B对小鼠混合淋巴细胞培养上清液

中白细胞介素质2（IL—2）活性的影响

x - ±s,n=6,*P<0.05, ***P<0.001与对照比较。

最近，我们证实，未纯化的小鼠脾细胞在体外培养时可发生自发性增殖，即自身混合淋巴细胞培养反应（A MLR），GL—B亦可显著促进这种反应。而更为有意义的是，24月龄老年小鼠的未纯化脾细胞的自发性增殖和IL—2分泌均较3月龄年轻小鼠显著减少，而GL—B则可剂量依赖性地使之逐渐恢复（表7-6）。

表7-6  灵芝多糖GL—B对老年小鼠脾细胞自发增殖和

白细胞介素质2（IL—2）产生的影响

x - ±s,n=6,+P<0.001与年轻对照比较,*P<0.05，**P<0.01,***P<0.001与老年对照比较。

我们还发现，GL—B与小鼠腹腔渗出细胞（主要为巨噬细胞）共同培养24h后，上清液和腹腔渗出细胞内IL—1明显增加，说明GL—B可促进腹腔渗出细胞合成和分泌IL—1（表7-7）。

表7-7  灵芝多糖GL—B对小鼠腹腔渗出细胞合成和分泌

白细胞介素质1（IL—1）的影响

x - ±s,n=6,*P<0.05，***P<0.001与对照比较。

最近，我们用Northern印迹转移杂交法观察GL—B对小鼠脾细胞内细胞因子和原癌基因mRNA表达的影响。结果证明，给小鼠灌胃GL—B（100mg/ml）7d，可明显促进脾细胞中细胞因子IL—2、IL—6、肿瘤坏死因（TNF）和原癌基因C-myc的mRNA表达，使表达量增加（表7-8）。这一结果在分子水平进一步证实了灵芝多糖的免疫调节作用。

表7-8  GL—B对小鼠脾细胞中IL—2、IL—6、TNF和

C-myc mRNA表达的影响

x - ±s,n=4,*P<0.05，***P<0.001与对照组比较。

树舌多糖（20mg/kg），皮下注射可提高荷瘤小鼠脾细胞产生IL—2和干扰素的能力。

薄芝液对ConA诱导的小鼠脾细胞IL—2的产生呈现双向作用，小剂量（1.5μg/ml）促进，大剂量（25μg/ml）抑制。